ГОСТ 31694-2012. Продукты пищевые, продовольственное сырье. Метод определения остаточного содержания антибиотиков тетрациклиновой группы с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектором
ГОСТ 31694-2012
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
ПРОДУКТЫ ПИЩЕВЫЕ, ПРОДОВОЛЬСТВЕННОЕ СЫРЬЕ
Метод определения остаточного содержания антибиотиков тетрациклиновой группы с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектором
Food products, food raw materials. Method of determination of the antibiotic residues of tetracycline group by High Performance Liquid Chromatography - Mass Spectrometry
МКС 67.050
67.100
67.120
Дата введения 2013-07-01
Предисловие
Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2009 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены"
Сведения о стандарте
1 ПОДГОТОВЛЕН Федеральным государственным бюджетным учреждением "Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов" (ФГБУ "ВГНКИ")
2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии
3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 1 октября 2012 г. N 51-2012)
За принятие проголосовали:
Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97 |
Код страны по |
Сокращенное наименование национального органа по стандартизации |
Армения |
AM |
Минэкономики Республики Армения |
Беларусь |
BY |
Госстандарт Республики Беларусь |
Казахстан |
KZ |
Госстандарт Республики Казахстан |
Кыргызстан |
KG |
Кыргызстандарт |
Молдова |
MD |
Молдова-Стандарт |
Российская Федерация |
RU |
Росстандарт |
Узбекистан |
UZ |
Узстандарт |
4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 29 ноября 2012 г. N 1424-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 31694-2012 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 01 июля 2013 г.
5 Стандарт подготовлен на основе ГОСТ Р 53601-2009
6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта публикуется в ежемесячно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты".
Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячно издаваемом информационном указателях "Национальные стандарты". В случае пересмотра или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована в ежемесячно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты"
ВНЕСЕНО Изменение N 1, утвержденное и введенное в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 27 октября 2016 года N 1523-ст c 01.03.2017
Изменение N 1 внесено изготовителем базы данных по тексту ИУС N 2, 2017 год
ВНЕСЕНЫ: поправка, опубликованная в ИУС N 7, 2017 год; поправка, опубликованная в ИУС N 10, 2018 год; поправка, опубликованная в ИУС N 2, 2020 год
Поправки внесены изготовителем базы данных
1 Область применения
Настоящий стандарт устанавливает метод идентификации и количественного определения остаточного содержания антибиотиков тетрациклиновой группы в молоке, молочной продукции, яйцах, яичном порошке, меде, органах и тканях животных в продуктах переработки мясного сырья, мяса птицы, субпродуктах, в том числе птичьих, рыбе, нерыбных объектах и продукции из них с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием в диапазоне измерений от 1,0 до 1000,0 мкг/кг.
(Измененная редакция, Изм. N 1).
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:
ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны
ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности
ГОСТ 12.1.019-79* Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты
________________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 12.1.019-2009 "Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".
ГОСТ 12.2.085-2002 Сосуды, работающие под давлением. Клапаны предохранительные. Требования безопасности
ГОСТ 245-76 Реактивы. Натрий фосфорнокислый однозамещенный 2-водный. Технические условия
ГОСТ 908-2004 Кислота лимонная моногидрат пищевая. Технические условия
ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
ГОСТ 2603-79 Реактивы. Ацетон. Технические условия
ГОСТ ИСО 5725-6-2003** Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике
________________
** На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике".
ГОСТ 5848-73 Реактивы. Кислота муравьиная. Технические условия
ГОСТ 6552-80 Реактивы. Кислота ортофосфорная. Технические условия
ГОСТ 8981-78 Эфиры этиловый и нормальный бутиловый уксусной кислоты технические. Технические условия
ГОСТ 10652-73 Реактивы. Соль динатриевая этилендиамин-N, N, N', N'-тетрауксусной кислоты 2-водная (трилон Б). Технические условия
ГОСТ 13867-68 Продукты химические. Обозначения чистоты
ГОСТ 19792-2001*** Мед натуральный. Технические условия
________________
*** На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 54644-2011 "Мед натуральный. Технические условия".
ГОСТ 24104-2001**** Весы лабораторные. Общие технические требования
________________
**** На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228-2008 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания".
ГОСТ 26809.1-2014 Молоко и молочная продукция. Правила приемки, методы отбора и подготовка проб к анализу. Часть 1. Молоко, молочные, молочные составные и молокосодержащие продукты
ГОСТ 26809.2-2014 Молоко и молочная продукция. Правила приемки, методы отбора и подготовка проб к анализу. Часть 2. Масло из коровьего молока, спреды, сыры и сырные продукты, плавленые сыры и плавленые сырные продукты
ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования
ГОСТ 29245-91 Консервы молочные. Методы определения физических и органолептических показателей
ГОСТ 31339-2006 Рыба, нерыбные объекты и продукция из них. Правила приемки и методы отбора проб
ГОСТ 31467-2012 Мясо птицы, субпродукты и полуфабрикаты из мяса птицы. Методы отбора проб и подготовка их к испытаниям
ГОСТ 31654-2012 Яйца куриные пищевые. Технические условия
ГОСТ 31720-2012 Пищевые продукты переработки яиц сельскохозяйственной птицы. Методы отбора проб и органолептического анализа"
Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов по указателю "Национальные стандарты", составленному по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.
(Измененная редакция, Изм. N 1), (Поправка. ИУС N 10-2018).
3 Сущность метода
3.1 Определение остаточных количеств антибиотиков тетрациклиновой группы проводят методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-МС/МС).
Метод ВЭЖХ-МС/МС обеспечивает хроматографическое разделение антибиотиков тетрациклиновой группы и их эпи-форм (приложение А).
3.2 Количественное определение остаточного содержания антибиотиков тетрациклиновой группы проводят методом внутреннего стандарта по сумме площадей пиков идентифицированных соединений и их эпи-форм для каждого антибиотика при помощи градуировочной кривой.
3.3 Детектирование анализируемых проб проводят в режиме регистрации выбранных реакций.
4 Средства измерений, вспомогательное оборудование, материалы, реактивы
4.1 При определении содержания антибиотиков тетрациклиновой группы применяют следующие средства измерений, вспомогательное оборудование и материалы:
- масс-спектрометр с диапазоном измерения от 100 до 500 атомных единиц массы (а.е.м.), массовым разрешением не менее 500, точностью измерения массы не ниже 0,2 а.е.м., с режимом получения и анализа фрагментных ионов (режим МС/МС);
- систему высокоэффективную жидкостную хроматографическую, состоящую из бинарного насоса со смесителем; термостата хроматографической колонки, обеспечивающего температуру нагрева до 50°С;
- компьютер с установленным программным обеспечением для управления масс-спектрометром и обработки результатов масс-спектрометрических измерений;
- весы лабораторные по ГОСТ 24104, высокого или специального класса точности, с наибольшим пределом взвешивания 220 и 500 г с ценой поверочного деления 0,1 и 1,0 мг соответственно;
- рН-метр с набором электродов, с пределами абсолютной погрешности измерений ±0,01 рН;
- пипетки одноканальные переменного объема 10-100 мм, 40-200 мм, 200-1000 мм, 1-5 см[1];
- пробирки мерные стеклянные П-1-5-0,1ХС, П-2-10-14/23 по ГОСТ 1770;
- пипетки стеклянные градуированные по ГОСТ 29227;
- колбы мерные стеклянные К-2-100-2, К-2-1000-2 по ГОСТ 1770;
- виалы (флаконы полипропиленовые) вместимостью 15 и 50 см с герметично закрывающимися пластмассовыми крышками [2];
- фильтры мембранные с размером пор не более 0,5 мкм [3];
- измельчитель-гомогенизатор лабораторный [4];
- встряхиватель вибрационный для пробирок орбитального типа движения с амплитудой встряхивания 3 мм и диапазоном скоростей от 150 до 2500 об/мин [5];
- центрифугу лабораторную рефрижераторную со скоростью вращения ротора не менее 10000 об/мин и диапазоном температур охлаждения от 4°С до 20°С, с адаптерами для пробирок вместимостью 15 см и микроцентрифужных пробирок вместимостью 1,5 см [6];
- модуль термостатируемый нагревательный с системой отдувки растворителей инертным газом и максимальной температурой термостатирования 40°С [7];
- баню ультразвуковую с рабочей частотой не менее 20 Гц и объемом не менее 1 дм [8];
- колонку хроматографическую обращенно-фазную длиной не менее 50 мм с диаметром частиц сорбента не более 5 мкм;
- устройство вакуумное для твердофазной экстракции;
- картридж для твердофазной экстракции объемом не менее 12 см, заполненный обращенно-фазным сорбентом с диаметром частиц не более 50 мкм;
- камеру лабораторную морозильную с цифровым контроллером температуры и рабочим диапазоном температур от минус 18°С до минус 24°С;
- холодильник бытовой с морозильной камерой, цифровым контроллером температуры и рабочим диапазоном температур от 0°С до 5°С.
(Измененная редакция, Изм. N 1), (Поправка. ИУС N 2-2020).
4.2 При определении содержания антибиотиков тетрациклиновой группы применяют следующие реактивы:
- кислоту лимонную пищевую по ГОСТ 908, высшего сорта;
- метанол х.ч.;
- ацетонитрил ч.д.а.;
- деионизованную воду;
- муравьиную кислоту ч.д.а. по ГОСТ 5848;
- натрий фосфорнокислый двузамещенный дигидрат ч.д.а по ГОСТ 245;
- соль динатриевую этилендиаминтетрауксусной кислоты (трилон Б) по ГОСТ 10652;
- ортофосфорную кислоту по ГОСТ 6552;
- этилацетат по ГОСТ 8981;
- ацетон по ГОСТ 2603;
- стандартный образец тетрациклина гидрохлорида с содержанием действующего вещества не менее 90% [9];
- стандартный образец окситетрациклина гидрохлорида с содержанием действующего вещества не менее 90% [10];
- стандартный образец хлортетрациклина гидрохлорида с содержанием действующего вещества не менее 90% [11];
- стандартный образец доксициклина с содержанием действующего вещества не менее 90% [12];
- стандартный образец демеклоциклина с содержанием действующего вещества не менее 90% [13].
Все реактивы должны относиться к подгруппе чистоты 2 (х.ч.) или 3 (ч.д.а.) по ГОСТ 13867.
5 Требования безопасности
5.1 Используемые в работе реактивы относятся к веществам 1-го и 2-го классов опасности по ГОСТ 12.1.007, при работе с ними необходимо соблюдать требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005.
5.2 Помещения, в которых проводят анализ и подготовку проб, должны быть оборудованы приточно-вытяжной вентиляцией.
5.3 Операции по приготовлению и дозированию градуировочных растворов следует проводить под тягой в вытяжном шкафу.
5.4 В связи с тем, что при работе на хромато-масс-спектрометре используется сжатый азот, следует соблюдать требования ГОСТ 12.2.085 и правил устройства и безопасной эксплуатации сосудов, работающих под давлением, действующих на территории государства, принявшего стандарт.
5.5 При выполнении измерений на хромато-масс-спектрометре следует соблюдать правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019 и инструкцией по эксплуатации прибора.
5.6 К выполнению измерений методом высокоэффективной жидкостной хроматографии - масс-спектрометрии допускаются лица, владеющие техникой ВЭЖХ-МС/МС и изучившие инструкции по эксплуатации аппаратуры.
6 Порядок подготовки к проведению измерений
6.1 Отбор проб
6.1.1 Отбор проб проводят в соответствии с методическими указаниями по отбору проб пищевой продукции с целью лабораторного контроля качества и безопасности, утвержденными на территории государства, принявшего стандарт.
6.1.2 Отбор проб органов, тканей животных и птицы производят в соответствии с [14] ГОСТ 31467. Масса средней пробы органов, тканей животных и птицы не менее 200 г.
(Измененная редакция, Изм. N 1).
6.1.3 Отбор проб молока и молочных продуктов производят в соответствии с ГОСТ 26809.1 и ГОСТ 26809.2. Объем средней пробы молока не менее 200 см, масса средней пробы образцов молочных продуктов не менее 250 г.
(Измененная редакция, Изм. N 1).
6.1.4 Отбор проб меда производят в соответствии с ГОСТ 19792. Масса средней пробы меда не менее 200 г.
6.1.5 Отбор проб яиц и яичного порошка производят в соответствии с ГОСТ 31654 и ГОСТ 31720. От яиц в качестве средней пробы отбирают не менее 12 шт.; масса средней пробы яичного порошка не менее 200 г.
(Измененная редакция, Изм. N 1).
6.1.6 Отбор проб рыбы, нерыбных объектов и продукции из них проводят по ГОСТ 31339. Срок хранения отобранных проб при температуре от 2°С до 8°С - двое суток. При отсутствии возможности исследования проб в течение двух суток образцы должны быть заморожены при температуре минус 20°С на срок хранения не более 2 мес.
(Введен дополнительно, Изм. N 1).
6.2 Подготовка хромато-масс-спектрометрической системы к выполнению измерений
Подготовку хромато-масс-спектрометра к работе осуществляют в соответствии с техническим руководством по эксплуатации прибора.
При этом должны быть соблюдены следующие условия:
- температура окружающего воздуха |
от 15°С до 30°С; |
- атмосферное давление |
от 84 до 106 кПа; |
- относительная влажность воздуха |
от 20% до 80%. |
(Поправка. ИУС N 7-2017).
6.3 Приготовление растворов
6.3.1 Приготовление раствора лимонной кислоты молярной концентрации 0,1 моль/дм
В мерную колбу вместимостью 1000 см вносят 21 г лимонной кислоты, растворяют в деионизированной воде и доводят объем до метки этим же растворителем.
Срок хранения при комнатной температуре - не более 1 мес.
6.3.2 Приготовление раствора гидрофосфата натрия молярной концентрации 0,2 моль/дм
В мерную колбу вместимостью 1000 см вносят 35,6 г двузамещенного фосфата натрия, растворяют в деионизированной воде и доводят объем до метки этим же растворителем.
Срок хранения при комнатной температуре - не более 1 мес.
6.3.3 Приготовление буферного раствора
Для приготовления буферного раствора в мерной колбе вместимостью 1000 см смешивают в соотношении 60:40 растворы лимонной кислоты и гидрофосфата натрия, полученные по 6.3.1 и 6.3.2, добавляют 37,2 г трилона Б, измеряют рН и, при необходимости, доводят значение рН до 4,0 ортофосфорной кислотой.
(Измененная редакция, Изм. N 1).
6.3.4 Приготовление растворов элюентов мобильной фазы А и Б
6.3.4.1 Для приготовления раствора элюента мобильной фазы А в мерную колбу вместимостью 1000 см приливают деионизованную воду, добавляют 5 см муравьиной кислоты и доводят объем до метки деионизованной водой.
Срок хранения при комнатной температуре - не более 1 мес.
6.3.4.2 Для приготовления раствора элюента мобильной фазы Б в мерную колбу вместимостью 1000 см приливают метиловый спирт, добавляют 5 см муравьиной кислоты и доводят объем до метки метиловым спиртом.
Срок хранения при комнатной температуре - не более 1 мес.
6.3.5 Приготовление градуировочных растворов
6.3.5.1 Приготовление градуировочных растворов тетрациклинов
Для приготовления градуировочных растворов тетрациклинов на весах с наибольшим пределом взвешивания 500 г взвешивают по 10 мг каждого стандартного образца по 4.1 (кроме демеклоциклина) и переносят в мерную пробирку вместимостью 10 см. Добавляют метанол, помещают в ультразвуковую баню на 1 мин и доводят полученный раствор до метки метанолом.
Массовая концентрация каждого антибиотика тетрациклиновой группы в растворе составляет 1 мг/см.
Срок хранения раствора - 3 мес при температуре минус 20°С.
6.3.5.2 Приготовление раствора демеклоциклина (внутреннего стандарта)
Для приготовления раствора внутреннего стандарта на весах с наибольшим пределом взвешивания 500 г взвешивают 10 мг стандарта демеклоциклина гидрохлорида и переносят в мерную пробирку вместимостью 10 см. Добавляют метанол, помещают в ультразвуковую баню на 1 мин, доводят полученный раствор до метки метанолом.
Массовая концентрация внутреннего стандарта в растворе составляет 1 мг/см. Путем нескольких разбавлений доводят массовую концентрацию раствора внутреннего стандарта до значения 1 мкг/см. Раствор с данной концентрацией используют для внесения в исследуемые образцы.
Срок хранения раствора - 3 мес при температуре минус 20°С.
Перед применением растворы выдерживают при комнатной температуре, в темном месте, не менее 20 мин.
6.4 Хроматографические условия измерений
6.4.1 Хромато-масс-спектрометр включают и настраивают в соответствии с техническим руководством по его эксплуатации и устанавливают следующие хроматографические параметры:
- скорость потока элюента - 200 мм/мин;
- объем вводимой пробы - 20 мм.
6.4.2 Детектирование пиков проводится методом "регистрации выбранных реакций". Для каждого антибиотика тетрациклиновой группы измеряется сигнал для двух фрагментных ионов согласно таблице 1.
_______________
"Регистрация выбранных реакций" - режим работы масс-спектрометра, при котором детектируется ионный ток только для выбранных фрагментных ионов выбранных ионов-прекурсоров.
Таблица 1 - Значения масс ионов-предшественников и ионов-фрагментов
Антибиотик тетрациклиновой группы |
Ион-предшественник, m/z* |
Ионы-фрагменты, m/z* |
Тетрациклин |
445,1 |
410,0 |
Окситетрациклин |
461,1 |
426,1 |
Доксициклин |
445,1 |
428,0 |
Хлортетрациклин |
479,1 |
444,1 |
Демеклоциклин |
465,1 |
448,1 |
* m/z - отношение массы иона к его заряду. |
Более интенсивный пик (верхний в каждой строке таблицы 1) служит для определения концентрации антибиотика, второй (нижний в каждой строке таблицы 1) используется для подтверждения правильности определения. Пики ионов-фрагментов с массой 410,1 тетрациклина и доксициклина различаются по времени их удержания в хроматографической колонке, определяемому на стадии разработки ВЭЖХ-МС/МС метода.
6.5 Построение градуировочной характеристики
6.5.1 Градуировочную кривую строят при помощи матричной градуировки. Для этого проводят обработку "чистых" проб, приготовленных и проанализированных ранее в соответствии с требованиями раздела 7, не содержащих тетрациклинов более 1 мкг/кг для каждого из антибиотиков, в зависимости от типа исследуемой матрицы. На стадии перерастворения перед введением в хроматограф в мерную пробирку вместимостью 5 см, содержащую исследуемую "чистую" пробу, добавляют градуировочный раствор тетрациклинов по 6.3.5.1 с таким расчетом, чтобы окончательные массовые концентрации находились в пределах от 1 до 1000 нг/см. Затем добавляют 50 мм раствора внутреннего стандарта по 6.3.5.2 и необходимое количество мобильной фазы А по 6.3.4.1, доводя объем до 1 см.
6.5.2 Для получения градуировочных данных используют не менее четырех уровней концентраций матричных градуировочных растворов.
6.5.3 При построении градуировочной зависимости для количественного определения тетрациклинов анализируют матричные градуировочные растворы различных уровней концентраций в условиях, описанных в 6.2 и 6.4. Затем строят графики зависимости массовой концентрации антибиотика тетрациклиновой группы от отношения площади хроматографического пика антибиотика тетрациклиновой группы к площади пика внутреннего стандарта для каждого фрагментного иона четырех антибиотиков тетрациклиновой группы. Образец графика приведен в приложении Б.
Построение графиков может проводиться при помощи программы обработки данных ВЭЖХ-МС/МС или при помощи программы Excel (Microsoft Office).
6.5.4 Расчетные концентрации для обоих фрагментных ионов каждого антибиотика тетрациклиновой группы должны совпадать в пределах 20%.
Градуировочная зависимость считается приемлемой, если рассчитанное значение квадрата коэффициента корреляции для градуировочной кривой каждого фрагментного иона каждого антибиотика тетрациклиновой группы не менее 0,98.
6.6 Подготовка лабораторной посуды и реактивов
6.6.1 Мойку и сушку посуды следует проводить в отдельном помещении, оборудованном приточно-вытяжной вентиляцией. Не допускается проведение подготовки посуды в данном помещении для других видов анализов. Для сушки лабораторной посуды и подготовки реактивов необходимо использовать отдельные сушильные шкафы.
6.6.2 Стеклянную посуду подвергают стандартной процедуре очистки лабораторной посуды с последующей последовательной промывкой органическими растворителями: этилацетатом (однократно), ацетоном (дважды).
6.6.3 Процедуру промывки органическими растворителями следует проводить в вытяжном шкафу. Рекомендуется на стадиях промывки использовать ультразвуковую баню. Окончательную сушку посуды проводят в сушильном шкафу, установленном в вытяжном шкафу, при температуре от 105°С до 110°С.
7 Порядок выполнения измерений
7.1 Обработка проб органов, тканей животных, яиц, яичного порошка, молока, молочных продуктов и меда, рыбы, нерыбных объектов и продукции из них*
________________
* Измененная редакция, Изм. N 1.
7.1.1 Мышечную ткань предварительно очищают от грубой соединительной ткани, кожи, костей и грубого хитинового покрова. Яйца отделяют от скорлупы. Каждую пробу измельчают на гомогенизаторе и взвешивают по 1,0 г гомогенизированной пробы в виале на лабораторных весах с наибольшим пределом взвешивания 200 г. В виалу добавляют 50 мм раствора внутреннего стандарта по 6.3.5.2 и оставляют для уравновешивания на 15 мин. Затем добавляют 10 см экстрационного буферного раствора по 6.3.3, закрывают крышкой и интенсивно перемешивают на встряхивателе в течение 15 мин. Далее виалы с образцами помещают на предварительно охлажденную до 4°С центрифугу и центрифугируют при 4000 об/мин в течение 20 мин. Процедуру экстракции и центрифугирования повторяют еще один раз. Объединенные экстракты собирают в чистые виалы.
(Измененная редакция, Изм. N 1).
7.1.2 1,0 г меда взвешивают на лабораторных весах с наибольшим пределом взвешивания 200 г в виале вместимостью 50 см. В виалу добавляют 50 мм раствора внутреннего стандарта по 6.3.5.2 и оставляют для уравновешивания на 15 мин. Затем добавляют 20 см экстрационного буферного раствора по 6.3.3, закрывают крышкой и интенсивно перемешивают на встряхивателе в течение 1 мин. Далее виалы с образцами помещают на предварительно охлажденную до 4°С центрифугу и центрифугируют при 4000 об/мин в течение 20 мин.
7.2 Проведение твердофазной экстракции и подготовка к хроматографированию
7.2.1 Для проведения твердофазной экстракции картридж для ТФЭ заполняют 0,5 г сорбента. Предварительно картридж кондиционируют 6 см метилового спирта и уравновешивают 6 см бидистиллированной воды. Затем наносят объединенный экстракт и вновь промывают 6 см бидистиллированной воды. Тетрациклины элюируют с сорбента при помощи 6 см мобильной фазы Б. Полученный элюат упаривают на нагревательном модуле в токе воздуха до 0,5 см при температуре 40°С.
7.2.2 Для перерастворения и подготовки к хроматографированию объем полученного упаренного элюата в мерной пробирке вместимостью 10 см доводят до 1 см при помощи мобильной фазы А и помещают на ультразвуковую баню на 1 мин. Полученный экстракт фильтруют через мембранный фильтр и используют для ВЭЖХ-МС/МС анализа.
7.3 Обработка проб молока
7.3.1 Для очистки образцов к навеске образца молока массой 1 г, помещенной в виалу, добавляют 100 мм раствора внутреннего стандарта по 6.3.5.2 и оставляют для уравновешивания на 15 мин. Затем добавляют 3 см ацетонитрила, закрывают крышкой и интенсивно перемешивают на встряхивателе в течение 3 мин, затем оставляют на 15 мин в горизонтальном положении для последующего уравновешивания. Далее виалу с образцом помещают на предварительно охлажденную до 4°С центрифугу и центрифугируют при 4000 об/мин в течение 20 мин. Полученный раствор переносят в мерную пробирку вместимостью 10 см и упаривают до 1 см на нагревательном модуле в токе воздуха при температуре 40°С. К полученному остатку добавляют 9 см буферного раствора 6.3.3 и помещают на ультразвуковую баню. Сухие молочные продукты восстанавливают по ГОСТ 29245 (пункт 3.4).
(Поправка. ИУС N 10-2018).
7.3.2 Процедуру твердофазной экстракции осуществляют в соответствии с 7.2.1, а перерастворение и подготовку к хроматографированию - в соответствии с 7.2.2.
7.4 ВЭЖХ-МС/МС анализ
7.4.1 Для определения остаточного содержания тетрациклинов и их эпи-форм проводят анализ в условиях, указанных в 6.4.
7.4.2 Время удерживания антибиотиков тетрациклиновой группы определяют при анализе градуировочных растворов.
7.5 Контроль качества измерений
7.5.1 Каждая серия измерений включает в себя несколько степеней подтверждения качества измерений.
7.5.2 Для исключения контаминации образца используемыми реагентами проводят обработку "чистого образца" в соответствии с 7.1-7.3 в зависимости от типа исследуемой матрицы.
7.5.3 Для учета матричного эффекта при расчете остаточных содержаний антибиотиков тетрациклиновой группы используют матричную градуировку по 6.5.
7.5.4 Проводят испытание образца с обработкой пробы в соответствии 7.1-7.3 в зависимости от типа исследуемой матрицы.
7.6 Обработка результатов хроматографического анализа
7.6.1 Расчеты содержания антибиотика тетрациклиновой группы выполняют с помощью градуировочной характеристики следующим образом. Вычисляют отношение площади пика фрагментного иона к площади внутреннего стандарта с помощью программы обработки спектров поставляемой вместе с хромато-масс-спектрометром. Затем, для найденного значения (абсциссы) находят точку на градуировочной характеристике. Ордината этой точки является искомым содержанием (приложение Б).
7.6.2 Окончательные результаты измерений содержания тетрациклинов округляют до целого значения и выражают в микрограммах на килограмм.
8 Метрологические характеристики
8.1 Установленный в настоящем стандарте метод обеспечивает выполнение измерений содержания тетрациклинов с расширенной неопределенностью результатов аналитических измерений при коэффициенте охвата 2, указанной в таблице 2.
Примечание - Значения относительной расширенной неопределенности, указанные в таблице 2, соответствуют границам относительной погрешности результатов измерений при 0,95.
Таблица 2 - Значения относительной расширенной неопределенности измерений (при коэффициенте охвата 2) , %, в диапазонах измерений содержаний антибиотиков тетрациклиновой группы, мкг/кг
Антибиотик тетрациклиновой группы | Относительная расширенная неопределенность , %, при 0,95 и диапазоне измерений содержания тетрациклинов, мкг/кг |
||
от 1,0 до 10,0 включ. |
св. 10,0 до 100,0 включ. |
св. 100,0 до 1000,0 включ. |
|
Тетрациклин |
69 |
27 |
12 |
Окситетрациклин |
67 |
28 |
20 |
Доксициклин |
80 |
25 |
12 |
Хлортетрациклин |
114 |
23 |
18 |
9 Оформление результатов измерений
9.1 Результат анализа в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде формулы
, (1)
где - среднеарифметическое значение двух параллельных измерений содержания -го антибиотика в анализируемой пробе, мкг/кг;
- расширенная неопределенность при коэффициенте охвата 2 определения содержания -го антибиотика тетрациклиновой группы, определяемая по формуле (2), мкг/кг.
9.2 Значения расширенной неопределенности измерения рассчитывают с использованием значений относительной расширенной неопределенности при 2 (в соответствии с таблицей 2) по формуле
, (2)
где - среднеарифметическое значение двух параллельных измерений содержания -го антибиотика в анализируемой пробе, мкг/кг;
- значение относительной расширенной неопределенности содержания -го антибиотика тетрациклиновой группы для соответствующего диапазона измерений (таблица 2).
10 Контроль качества результатов измерений
10.1 Контроль полноты извлечения внутреннего стандарта тетрациклинов
10.1.1 Контроль извлечения внутреннего стандарта тетрациклинов выполняют в ходе каждого измерения (получения результата количественного химического анализа при соблюдении требований настоящего стандарта).
10.1.2 Рассчитанные программным обеспечением значения извлечения внутренних стандартов должны находиться в диапазоне от 40% до 130%. Если рассчитанное значение извлечения ниже или выше указанного диапазона, то результаты измерения массовой доли тетрациклинов не принимают за окончательный результат. Проводят повторные исследования анализируемых проб.
10.2 Контроль неопределенности результатов измерений
При проведении испытаний рекомендуется в ходе анализа каждой серии образцов с использованием стандартной процедуры пробоподготовки (см. 7.1 и 7.3) проводить анализ градуировочных растворов в соответствии с 6.4. Результаты измерений признают удовлетворительными при выполнении следующего неравенства:
, (3)
где - рассчитанное с помощью градуировочной характеристики значение содержания -го антибиотика тетрациклиновой группы в анализируемой пробе, мкг/кг;
- значение содержания -го антибиотика по паспорту на стандартный образец, мкг/кг;
- значение относительной расширенной неопределенности содержания -го антибиотика тетрациклиновой группы для соответствующего диапазона измерений (таблица 2), %.
Приложение А (справочное). Структурные формулы антибиотиков тетрациклинового ряда
Приложение А
(справочное)
Приложение Б (справочное). Отношение площади пика иона антибиотика к площади пика иона внутреннего стандарта
Приложение Б
(справочное)
Рисунок Б.1 - Отношение площади пика иона антибиотика к площади пика иона внутреннего стандарта
Приложение В (обязательное). Контроль стабильности результатов измерений
Приложение В
(обязательное)
Периодичность контроля стабильности результатов измерений регламентируют в руководстве по качеству лаборатории*.
________________
* Документ в информационных продуктах не содержится. За информацией о документе Вы можете обратиться в Службу поддержки пользователей. - Примечание изготовителя базы данных.
Контроль стабильности результатов измерений в лаборатории при реализации методики осуществляют по ГОСТ ИСО 5725-6, используя контроль стабильности среднеквадратического (стандартного) отклонения промежуточной прецизионности рутинного анализа с изменяющимися факторами "время" и "оператор".
Применяя метод контрольных карт Шухарта, проверяют стабильность этих результатов измерений и оценивают стандартное отклонение промежуточной прецизионности с изменяющимися факторами "время" и "оператор". После отбора испытуемую пробу от каждой партии подготавливают в лаборатории для анализа. Одну пробу, подвергавшуюся анализу во время смены (), анализирует повторно другой оператор в другую смену (), и результаты сравнивают. Значение стандартного отклонения промежуточной прецизионности () устанавливают в лаборатории по результатам измерений за предыдущий период. Параметры контрольной карты пределов для каждого диапазона рассчитывают следующим образом:
- среднюю линию по формуле
, (4)
где - среднеквадратическое отклонение промежуточной прецизионности, %;
- верхний предел действия по формуле
; (5)
- верхний предел предупреждения по формуле
. (6)
Расхождение () рассчитывают по формуле
. (7)
Расхождение наносят на карту в течение контролируемого периода.
Рекомендуется устанавливать контролируемый период так, чтобы количество результатов контрольных измерений было от 20 до 30. После этого проводят оценку стандартного отклонения промежуточной прецизионности () результатов по формуле
, (8)
где - число измерений.
Полученное значение используют для последующего контроля стабильности результатов измерений.
Библиография
[1] |
Пипетки переменного объема одноканальные, Transferpettor Brand, Германия |
[2] |
Виалы (флаконы полипропиленовые) вместимостью 15 и 50 см, Corning 430790 и 430290 |
[3] |
Фильтры мембранные с размером пор 0,5 мкм, Acrodisc CR 13 мм, 0,2 мкм, Life Sciences PN 4423T |
[4] |
Измельчитель-гомогенизатор лабораторный МMR 0801/01, Bosch, Германия |
[5] |
Вибрационный встряхиватель для пробирок (вортекс) Multi Reax, Heidolph, Германия |
[6] |
Центрифуга лабораторная роторная рефрижераторная, Beckman, Германия |
[7] |
Термостатируемый нагревательный модуль с системой отдувки растворителей инертным газом, Reacti-Therm (Pierce, США) |
[8] |
Ультразвуковая баня, Elma S 30 Н, Германия |
[9] |
Стандартный образец тетрациклина гидрохлорида, USP, Sigma, T4062 |
[10] |
Стандартный образец окситетрациклина гидрохлорида, USP, Sigma, O5875 |
[11] |
Стандартный образец хлортетрациклина гидрохлорида, USP, Sigma, C4881 |
[12] |
Стандартный образец доксициклина, USP, Sigma, D9891 |
[13] |
Стандартный образец демеклоциклина, USP, Sigma, D6140 |
[14] ИСО 17604:2003 |
Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Отбор проб с туши для микробиологического анализа (Microbiology of food and animal feeding stuffs. Carcass sampling for microbiological analysis) |
УДК 637,638:614.3:006.354 |
МКС |
67.050 |
67.100 |
||
67.120 |
||
Ключевые слова: пищевые продукты, продовольственное сырье, антибиотики тетрациклиновой группы, метод определения содержания с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием |
209 комментариев
Incredible lots of terrific tips.
<a href=https://customthesiswritingservice.com/>can thesis service tell my mortgage provider about my loan</a> thesis statement paragraph <a href=https://writingthesistops.com/>thesis writing services custom thesis writing service</a> help me write a thesis
Fantastic material. Thank you!
<a href="https://homeworkcourseworkhelps.com/">can i pay someone to do my homework</a> should i do my homework now quiz <a href="https://helpmedomyxyzhomework.com/">to do my homework</a> i must do my homework
Really all kinds of awesome data!
where can i find someone to do my essay <a href="https://gseomail.com/">essay writer review</a> essays for me
Thanks a lot, Loads of stuff!
sugarhouse casino online pa <a href=https://bestonlinecasinoreal.us/>best welcome bonus online casino</a> best online casino review
what website writes essays for you <a href="https://eseomail.com/">introduce yourself as a writer essay</a> pay somebody to do my essay
Incredible tons of superb knowledge.
<a href="https://ouressays.com/">online research paper writers</a> research paper writer services <a href="https://researchpaperwriterservices.com/">proposal for phd</a> writing research paper service
Wow a good deal of excellent material.
<a href="https://ouressays.com/">custom research paper writing service</a> research proposal writer <a href="https://researchpaperwriterservices.com/">buying a research paper for college</a> parts of research proposal
Information very well taken!.
<a href="https://quality-essays.com/">buy narrative essays</a> pay for your essay <a href="https://buyanessayscheaponline.com/">pay someone to write paper</a> pay to do my essay
<a href=https://essaywritingservicelinked.com/>article writing service</a> custom essay service <a href=https://essaywritingservicetop.com/>best online essay writing services</a> essay review service
help with writing personal statement https://writinganessaycollegeservice.com
Kudos, I value it!
<a href=https://topswritingservices.com/>paper writing service reddit</a> are essay writing services safe <a href=https://essaywriting4you.com/>professional cv writing service</a> essay writing samples
With thanks, Quite a lot of advice!
<a href=https://essaypromaster.com/>research paper writer</a> writing papers <a href=https://paperwritingservicecheap.com/>college papers for sale</a> term paper writers
Nicely put, Thanks a lot.
<a href="https://englishessayhelp.com/">help with college essay</a> essay help websites <a href="https://essaywritinghelperonline.com/">essay writing service uk</a> buy essay
Seriously plenty of awesome data.
<a href="https://researchproposalforphd.com/">research paper help</a> write my research paper <a href="https://writingresearchtermpaperservice.com/">custom research paper</a> buy a research paper online
Great posts. Thank you!
<a href="https://phdthesisdissertation.com/">write a dissertation</a> write my dissertation for me <a href="https://writeadissertation.com/">dissertation writing services reviews</a> data analysis dissertation help
<a href=https://ouressays.com/>write my term paper</a> write my term paper <a href=https://researchpaperwriterservices.com/>write a research proposal</a> buy research paper online
when writing an essay https://essaywritingservicelinked.com
<a href=https://service-essay.com/>buy custom papers online</a> buy papers online cheap <a href=https://custompaperwritingservices.com/>professional paper writing services</a> paper writing services for college students
Cheers! Good stuff!
<a href="https://writingpaperforme.com/">write paper</a> writers of the federalist papers <a href="https://custompaperwritersservices.com/">best essay writers</a> how to write a paper
<a href=https://dissertationwritingtops.com/>dissertation proposal</a> uk dissertation help <a href=https://helpwritingdissertation.com/>what is a phd</a> dissertation research and writing
how to write a conclusion for a essay https://bestmasterthesiswritingservice.com
Nicely put. Cheers.
<a href="https://essaywritingservicehelp.com/">my essay service</a> writing an opinion essay <a href="https://essaywritingservicebbc.com/">essay writing service uk cheap</a> essay writing service review
Regards, I appreciate it.
<a href="https://bestpaperwritingservice.com/">where to buy writing paper</a> papers writing service <a href="https://bestonlinepaperwritingservices.com/">thesis paper writing service</a> custom thesis papers
<a href=https://domyhomeworkformecheap.com/>do my homework for me cheap</a> should i do my homework <a href=https://domycollegehomeworkforme.com/>do my math homework for me</a> do my homework for free
reliable essay writing service https://cheapessaywriteronlineservices.com
Nicely put, With thanks!
<a href=https://essaywritingservicehelp.com/>essay help service</a> buy essay writing service <a href=https://essaywritingservicebbc.com/>essay writing service dublin</a> good essay writing service
Thank you! A lot of stuff!
<a href="https://ouressays.com/">proposal writer</a> writing proposal <a href="https://researchpaperwriterservices.com/">college research paper writing service</a> research paper writer
Regards. I value this.
<a href="https://service-essay.com/">cheap custom written papers</a> paper writing service <a href="https://custompaperwritingservices.com/">custom papers</a> paper writer services
<a href=https://studentessaywriting.com/>essay writing site</a> cheap custom writing service <a href=https://essaywritingserviceahrefs.com/>writing an opinion essay</a> best essay writing service in usa
college admission essay help https://homeworkcourseworkhelps.com
Kudos. Numerous knowledge.
<a href=https://writingpaperforme.com/>write paper for me</a> research paper writers <a href=https://custompaperwritersservices.com/>write paper for me reviews</a> write my paper for me
Nicely put. Cheers!
<a href="https://topswritingservices.com/">college essay writing help</a> free essay writing service <a href="https://essaywriting4you.com/">writing a compare and contrast essay</a> cheap reliable essay writing service
<a href=https://phdthesisdissertation.com/>writing dissertation service</a> masters dissertation help <a href=https://writeadissertation.com/>help with dissertations</a> dissertation editing services
why i want to go to college essay https://researchproposalforphd.com
Kudos, I value this!
<a href="https://writinganessaycollegeservice.com/">professional paper writing service</a> online essay writing service <a href="https://essayservicehelp.com/">online essay writing</a> essay writing help
<a href=https://payforanessaysonline.com/>pay to get an essay written</a> essay papers for sale <a href=https://buycheapessaysonline.com/>pay to write papers</a> pay for research paper
music for writing essays https://essaywritingservicebbc.com
<a href="https://essaypromaster.com/">how to write an analysis paper</a> write a paper <a href="https://paperwritingservicecheap.com/">pay someone to write my paper</a> how to write an abstract for a research paper
Awesome material. Cheers.
<a href=https://studentessaywriting.com/>writing an analytical essay</a> term paper writing service <a href=https://essaywritingserviceahrefs.com/>essay writing service reddit</a> wikipedia writing service
Really lots of very good knowledge.
<a href="https://payforanessaysonline.com/">pay for essay online</a> essay writer pay <a href="https://buycheapessaysonline.com/">pay for essays</a> pay someone to write your paper
<a href=https://service-essay.com/>cheap paper writing service</a> paper writing service reddit <a href=https://custompaperwritingservices.com/>online research paper writing services</a> pay for a paper
how to write an essay conclusion https://topswritingservices.com
Kudos! Ample forum posts!
<a href="https://service-essay.com/">pay someone to write your paper</a> buy a college paper <a href="https://custompaperwritingservices.com/">custom handwriting paper</a> pay for papers
Thank you. Lots of advice.
<a href=https://ouressays.com/>custom research paper writing services</a> custom term paper <a href=https://researchpaperwriterservices.com/>college term paper writing service</a> custom research paper writing service
Helpful facts. Cheers.
<a href="https://writingpaperforme.com/">write my paper for cheap</a> online paper writers <a href="https://custompaperwritersservices.com/">college paper writers</a> professional paper writers
Many thanks. Valuable information.
<a href="https://argumentativethesis.com/">best master thesis writing service</a> writing a thesis <a href="https://bestmasterthesiswritingservice.com/">phd thesis database</a> thesis search
<a href=https://essayssolution.com/>automatic essay writer</a> essays for me <a href=https://cheapessaywriteronlineservices.com/>someone do my essay</a> write my research paper for me cheap
how to write a college essay https://cheapessaywriteronlineservices.com
Thanks! I enjoy this!
<a href=https://essayssolution.com/>help me write my essay</a> do an essay for me <a href=https://cheapessaywriteronlineservices.com/>write my college essay</a> write my thesis for me
<a href="https://service-essay.com/">paper writing services online</a> where can you buy resume paper <a href="https://custompaperwritingservices.com/">pay someone to write your paper</a> paper writing service
<a href=https://writinganessaycollegeservice.com/>writing a college essay</a> unique essay writing service <a href=https://essayservicehelp.com/>best resume writing service</a> college essay writing help
writing a critical essay https://essaywritingservicelinked.com
You said it very well..
<a href="https://ouressays.com/">pay someone to write my research paper</a> research proposal in education <a href="https://researchpaperwriterservices.com/">custom research paper</a> write a research proposal
Tips clearly regarded..
<a href=https://essaypromaster.com/>how to write an abstract for a research paper</a> write my paper for me cheap <a href=https://paperwritingservicecheap.com/>research paper writers</a> do my papers
Nicely put. Appreciate it!
<a href="https://essaytyperhelp.com/">college essay writing help</a> essay writing help <a href="https://helptowriteanessay.com/">medical school application essay help</a> help with essay writing
<a href=https://domyhomeworkformecheap.com/>buy coursework</a> just do my homework <a href=https://domycollegehomeworkforme.com/>do my writing homework</a> coursework writing service
best content writing websites https://cheapessaywriteronlineservices.com
Cheers. Loads of knowledge.
<a href="https://theessayswriters.com/">professional essay writers for hire</a> write my essay for me cheapdo my essay for me <a href="https://bestcheapessaywriters.com/">do essays for me</a> write my essay for money
Superb posts, Cheers.
<a href=https://topswritingservices.com/>essay writing app</a> australian essay writing service <a href=https://essaywriting4you.com/>writing a persuasive essay</a> professional essay writing services
This is nicely expressed. .
<a href="https://phdthesisdissertation.com/">order dissertation</a> dissertation services <a href="https://writeadissertation.com/">nursing dissertation writing services</a> dissertation only phd
<a href=https://essayssolution.com/>do my essay online</a> writing a personal essay <a href=https://cheapessaywriteronlineservices.com/>spanish essay writer</a> someone write my essay for me
what is the best college essay editing service https://helptowriteanessay.com
Truly lots of superb tips!
<a href="https://essaywritingservicehelp.com/">custom writing service</a> seo article writing service <a href="https://essaywritingservicebbc.com/">cheap essay writing service uk</a> seo article writing service
Great write ups, Thank you.
<a href=https://phdthesisdissertation.com/>phd.research</a> best dissertation help services <a href=https://writeadissertation.com/>dissertation editors</a> do my dissertation
Valuable knowledge. Appreciate it.
<a href="https://essaypromaster.com/">how to write an abstract for a research paper</a> write my paper reviews <a href="https://paperwritingservicecheap.com/">automatic essay writer</a> research paper writers
<a href=https://ouressays.com/>buy term paper</a> research paper writers <a href=https://researchpaperwriterservices.com/>proposal writing</a> write my term paper
final year dissertation https://hireawriterforanessay.com
Nicely put, Thanks!
<a href="https://essayssolution.com/">write my research paper for me</a> essay writer website <a href="https://cheapessaywriteronlineservices.com/">online essay writer</a> essay writers
Many thanks, I value this.
<a href="https://payforanessaysonline.com/">pay for essay online</a> pay for essays <a href="https://buycheapessaysonline.com/">pay for essays</a> pay to write my essay
<a href="https://studentessaywriting.com/">press release writing service</a> seo article writing service <a href="https://essaywritingserviceahrefs.com/">fast essay writing service</a> custom essay writing service
<a href=https://customthesiswritingservice.com/>thesis sentence</a> thesis writing <a href=https://writingthesistops.com/>good thesis statement</a> research thesis
cheap essay buy https://payforanessaysonline.com
Appreciate it! Lots of data.
<a href=https://payforanessaysonline.com/>buy essay papers</a> buy essay papers <a href=https://buycheapessaysonline.com/>buy an essay</a> pay for essay reviews
This is nicely put! !
<a href=https://essaytyperhelp.com/>help with essay writing</a> best essay writing service <a href=https://helptowriteanessay.com/>college application essay help</a> the college essay guy
<a href="https://theessayswriters.com/">write my essay online</a> essay write <a href="https://bestcheapessaywriters.com/">writing a personal essay</a> write my paper for me free
<a href="https://quality-essays.com/">buy essays online</a> pay for essay papers <a href="https://buyanessayscheaponline.com/">pay to write paper</a> pay for paper
<a href=https://payforanessaysonline.com/>buy essay online</a> buy essays cheap <a href=https://buycheapessaysonline.com/>pay for essay papers</a> pay for essay reviews
writing a persuasive essay https://domyhomeworkformecheap.com
Kudos, A good amount of advice.
<a href="https://helpwithdissertationwriting.com/">best dissertation</a> dissertation proposal <a href="https://dissertationwritingtops.com/">dissertation data analysis help</a> dissertation writing services
Regards! I value it.
<a href=https://phdthesisdissertation.com/>buy dissertations</a> dissertation help <a href=https://writeadissertation.com/>dissertation abstracts</a> dissertation abstracts
Helpful facts. Many thanks!
<a href="https://domyhomeworkformecheap.com/">can you do my homework</a> xyz homework <a href="https://domycollegehomeworkforme.com/">xyz homework</a> homework help
<a href=https://homeworkcourseworkhelps.com/>pay to do my homework</a> do my programming homework <a href=https://helpmedomyxyzhomework.com/>cpm homework help</a> do my homework
how to write and essay https://hireawriterforanessay.com
Fantastic info. Appreciate it!
<a href=https://englishessayhelp.com/>cheap essay help</a> essay typer <a href=https://essaywritinghelperonline.com/>writing help</a> essaypro
Terrific material. Thanks!
<a href="https://argumentativethesis.com/">thesis template</a> research thesis <a href="https://bestmasterthesiswritingservice.com/">tentative thesis</a> a thesis
<a href=https://service-essay.com/>best college paper writing service</a> best college paper writing service <a href=https://custompaperwritingservices.com/>paper writing service</a> best paper writing services
essay writing help https://bestcheapessaywriters.com
Good forum posts. Cheers!
<a href=https://writingpaperforme.com/>paper writer services</a> research paper writers <a href=https://custompaperwritersservices.com/>essay writer</a> professional essay writers
This is nicely said. .
<a href="https://topswritingservices.com/">my essay service</a> online essay writing services <a href="https://essaywriting4you.com/">essay writer service</a> personal essay writing service
Regards. Helpful information!
<a href="https://essaywritingservicehelp.com/">term paper writing services</a> spongebob writing essay <a href="https://essaywritingservicebbc.com/">cheap paper writing service</a> college essay writing tips
<a href=https://homeworkcourseworkhelps.com/>do my college homework</a> xyz homework <a href=https://helpmedomyxyzhomework.com/>do my homework for money</a> do my math homework for me
custom essay org https://dissertationwritingtops.com
Thanks! I like this!
<a href=https://hireawriterforanessay.com/>write this essay for me</a> write my essay for me <a href=https://theessayswriters.com/>ai essay writer</a> write my essays online
Position well taken..
<a href="https://topswritingservices.com/">best essay writing website</a> is essay writing service legal <a href="https://essaywriting4you.com/">scholarship essay writing service</a> best essay service
Good information. Thanks!
<a href="https://domyhomeworkformecheap.com/">do my college homework</a> reddit do my homework <a href="https://domycollegehomeworkforme.com/">do my college homework</a> my homework
<a href=https://researchproposalforphd.com/>research paper proposal</a> research paper helper <a href=https://writingresearchtermpaperservice.com/>research paper writers</a> college term papers
dissertation topics https://topswritingservices.com
Nicely put. Thanks a lot.
<a href=https://essayssolution.com/>write an essay for me</a> write a essay <a href=https://cheapessaywriteronlineservices.com/>essay writer free trial</a> write my paper for me free
Terrific write ups. Many thanks.
<a href="https://essaypromaster.com/">research paper writers</a> online essay writer <a href="https://paperwritingservicecheap.com/">essay writer website</a> how to write an apa paper
You said it very well.!
<a href="https://englishessayhelp.com/">paper writing help</a> argumentative essay <a href="https://essaywritinghelperonline.com/">help me write an essay</a> college application essay help
<a href=https://domyhomeworkformecheap.com/>homework</a> do my chemistry homework <a href=https://domycollegehomeworkforme.com/>do my finance homework</a> cpm homework help
college success essay https://ouressays.com
Awesome data. Appreciate it.
<a href="https://customthesiswritingservice.com/">thesis statement meaning</a> how to write thesis <a href="https://writingthesistops.com/">example thesis</a> thesis help
You have made your point!
<a href="https://bestpaperwritingservice.com/">pay for research paper</a> cheap research paper writing service <a href="https://bestonlinepaperwritingservices.com/">custom papers</a> buying papers for college
<a href=https://essaypromaster.com/>best essay writers</a> pay someone to write my paper <a href=https://paperwritingservicecheap.com/>professional essay writers</a> research paper writer
college essay guidelines https://essaywritingservicetop.com
This is nicely put! !
<a href=https://homeworkcourseworkhelps.com/>do my homework for money</a> cpm homework help <a href=https://helpmedomyxyzhomework.com/>homework</a> pay someone to do my homework
You said it perfectly..
<a href="https://customthesiswritingservice.com/">thesis topic</a> good thesis statement <a href="https://writingthesistops.com/">argumentative thesis statement</a> thesis statement
Regards! Loads of write ups.
<a href="https://writingpaperforme.com/">write my paper</a> paper writing <a href="https://custompaperwritersservices.com/">essay writer review</a> writing a paper
<a href=https://customthesiswritingservice.com/>phd thesis database</a> a thesis <a href=https://writingthesistops.com/>doctoral thesis</a> thesis statement meaning
christian ghostwriting services https://topswritingservices.com
Regards, I enjoy it.
<a href=https://domyhomeworkformecheap.com/>pay to do my homework</a> do my finance homework <a href=https://domycollegehomeworkforme.com/>online coursework</a> do my homework for free
<a href="https://essaytyperhelp.com/">paperhelp</a> paper writing help <a href="https://helptowriteanessay.com/">need help writing an essay</a> essaytyper
<a href=https://dissertationwritingtops.com/>dissertation writing</a> dissertation abstracts international <a href=https://helpwritingdissertation.com/>dissertation writing</a> dissertation help
best college admission essays https://ouressays.com
Very good data. Cheers!
<a href="https://essaywritingservicelinked.com/">best essay writing service reddit</a> grad school essay writing service <a href="https://essaywritingservicetop.com/">custom essay writing service</a> will writing service
You made your point quite well.!
<a href=https://essayssolution.com/>write my essay online</a> help me write my essay <a href=https://cheapessaywriteronlineservices.com/>write my essay for me free</a> writing a persuasive essay
Wow plenty of awesome facts.
<a href="https://customthesiswritingservice.com/">thesis statement meaning</a> argumentative thesis statement <a href="https://writingthesistops.com/">argumentative thesis</a> write a thesis
<a href="https://bestpaperwritingservice.com/">custom research paper writing services</a> college paper writing service <a href="https://bestonlinepaperwritingservices.com/">buy college paper</a> pay for research paper
<a href=https://writingpaperforme.com/>pay for paper</a> write a paper <a href=https://custompaperwritersservices.com/>paper writing</a> essay writer
how to write a thesis statement for a essay https://essaywritingservicebbc.com
Wow lots of awesome information.
<a href=https://essaywritingservicehelp.com/>essay writing site</a> mba essay writing service <a href=https://essaywritingservicebbc.com/>writing an expository essay</a> coursework writing service
You said it nicely..
<a href="https://payforanessaysonline.com/">essays for sale</a> pay to write essay <a href="https://buycheapessaysonline.com/">essays for sale</a> essays for sale
Regards! I appreciate this.
<a href="https://writingpaperforme.com/">professional paper writers</a> write my paper <a href="https://custompaperwritersservices.com/">essay writers</a> essay writer free
Terrific material. Many thanks!
<a href="https://quality-essays.com/">essay for sale</a> buy essay <a href="https://buyanessayscheaponline.com/">pay to write essay</a> buy essay papers
<a href=https://englishessayhelp.com/>best essay writing service</a> cheap essay help <a href=https://essaywritinghelperonline.com/>essay helper</a> essay writing help
how to write an interpretive essay https://helpwritingdissertation.com
Awesome postings. Thanks a lot.
<a href=https://quality-essays.com/>pay for an essay</a> buy essays <a href=https://buyanessayscheaponline.com/>pay to write essay</a> pay for essays
Amazing material, With thanks.
<a href="https://quality-essays.com/">pay for essays</a> essay for sale <a href="https://buyanessayscheaponline.com/">pay for papers</a> pay for essay reviews
Many thanks! Useful information.
<a href=https://researchproposalforphd.com/>term papers</a> proposal writing <a href=https://writingresearchtermpaperservice.com/>research paper help</a> write my term paper
Cheers. A lot of posts.
<a href="https://hireawriterforanessay.com/">write my essay cheap</a> who can write my essay <a href="https://theessayswriters.com/">writing essays</a> writing a good essay
Many thanks. I like this.
<a href="https://essayssolution.com/">write my essay</a> website that writes essays for you <a href="https://cheapessaywriteronlineservices.com/">writing a good essay</a> do my essay free
<a href=https://payforanessaysonline.com/>pay someone to write paper</a> pay for essay reviews <a href=https://buycheapessaysonline.com/>pay for essay</a> buy essays cheap
definition essay help https://helpmedomyxyzhomework.com
Terrific forum posts. Thanks!
<a href="https://dissertationwritingtops.com/">dissertation editing</a> dissertation paper <a href="https://helpwritingdissertation.com/">dissertation definition</a> writing dissertation
<a href="https://service-essay.com/">pay someone to write your paper</a> college paper writing service <a href="https://custompaperwritingservices.com/">buy a paper for college</a> pay for paper
<a href=https://topswritingservices.com/>essay writing site</a> writing an expository essay <a href=https://essaywriting4you.com/>buy essay writing service</a> writing an essay
best custom essay https://cheapessaywriteronlineservices.com
Many thanks! Excellent stuff.
<a href=https://englishessayhelp.com/>help me write my essay</a> the college essay guy <a href=https://essaywritinghelperonline.com/>helping others essay</a> paper writing help
Regards. An abundance of info.
<a href="https://studentessaywriting.com/">writing essays services</a> essay writing services <a href="https://essaywritingserviceahrefs.com/">cheap reliable essay writing service</a> essay writing paper
With thanks! Excellent information!
<a href="https://homeworkcourseworkhelps.com/">do my homework for money</a> can you do my homework <a href="https://helpmedomyxyzhomework.com/">do my homework for money</a> pay someone to do my homework
<a href=https://phdthesisdissertation.com/>dissertation def</a> dissertation writer <a href=https://writeadissertation.com/>phd dissertation</a> definition of dissertation
things to write a compare and contrast essay on https://essayssolution.com
Awesome knowledge. Thank you.
<a href="https://writingpaperforme.com/">automatic essay writer</a> online essay writer <a href="https://custompaperwritersservices.com/">pay someone to write your paper</a> write a paper for me
Nicely put, Cheers.
<a href=https://quality-essays.com/>order essay online</a> buy essay <a href=https://buyanessayscheaponline.com/>buy essay online</a> pay for essay online
Nicely put. Thanks a lot!
<a href="https://writingpaperforme.com/">write my paper</a> how to write an abstract for a research paper <a href="https://custompaperwritersservices.com/">paper writer online</a> research paper writer services
<a href=https://writinganessaycollegeservice.com/>essay writing</a> pro essay writing service <a href=https://essayservicehelp.com/>application essay writing service</a> best essay writer service
technical writer https://writinganessaycollegeservice.com
Thank you. Useful stuff.
<a href=https://hireawriterforanessay.com/>online essay writers</a> professional essay writers <a href=https://theessayswriters.com/>help me write my essay</a> write an essay for me
Great content, Thanks a lot.
<a href="https://ouressays.com/">buy term paper</a> proposal introduction <a href="https://researchpaperwriterservices.com/">elements of a research proposal</a> termpaper
<a href=https://writinganessaycollegeservice.com/>admission essay services</a> custom essay writing <a href=https://essayservicehelp.com/>custom essay service</a> buy essay writing service
phd writer https://bestpaperwritingservice.com
Kudos, I value it.
<a href="https://englishessayhelp.com/">cheap essay help</a> essay help <a href="https://essaywritinghelperonline.com/">help with my essay</a> free writing assistant
Good content, Kudos.
<a href="https://essayssolution.com/">essay writer</a> essay writer <a href="https://cheapessaywriteronlineservices.com/">write my essay for free</a> write essay
<a href=https://essaywritingservicehelp.com/>custom essay writing</a> writing essays online <a href=https://essaywritingservicebbc.com/>legitimate essay writing service</a> professional essay writing
top essay writing services https://essaytyperhelp.com
Awesome info. Appreciate it!
<a href="https://essaypromaster.com/">automatic essay writer</a> professional paper writers <a href="https://paperwritingservicecheap.com/">essay writter</a> how to write an abstract for a research paper
Tips well applied!.
<a href="https://service-essay.com/">buy a paper for college</a> college paper writing service <a href="https://custompaperwritingservices.com/">pay to write paper</a> pay for research paper
<a href=https://dissertationwritingtops.com/>dissertation writer</a> dissertation writing <a href=https://helpwritingdissertation.com/>dissertation abstracts</a> dissertation writing service
dissertation binding service https://custompaperwritingservices.com
You said it perfectly..
<a href=https://domyhomeworkformecheap.com/>reddit do my homework</a> do my programming homework <a href=https://domycollegehomeworkforme.com/>homework help cpm</a> coursework
Really a good deal of very good info.
<a href="https://quality-essays.com/">pay for essay</a> pay for essay online <a href="https://buyanessayscheaponline.com/">buy essay papers</a> buy essays cheap
Awesome tips. Kudos.
<a href=https://ouressays.com/>proposal writing</a> proposal research <a href=https://researchpaperwriterservices.com/>research proposals</a> proposal introduction
<a href="https://payforanessaysonline.com/">pay for an essay</a> pay for an essay <a href="https://buycheapessaysonline.com/">pay for essay</a> pay to write paper
<a href=https://homeworkcourseworkhelps.com/>online coursework</a> pay to do my homework <a href=https://helpmedomyxyzhomework.com/>homework help</a> hire someone to do my homework
why is college important essay https://phdthesisdissertation.com
This is nicely expressed! !
<a href="https://dissertationwritingtops.com/">phd paper</a> dissertation writing services reviews <a href="https://helpwritingdissertation.com/">dissertation</a> phd dissertation writing
Thanks. Awesome information.
<a href=https://ouressays.com/>proposal writer</a> research paper writer services <a href=https://researchpaperwriterservices.com/>term paper</a> online proposal
Good info. Thank you!
<a href="https://writinganessaycollegeservice.com/">cheap essay writing</a> cheap essay service <a href="https://essayservicehelp.com/">legit essay writing services</a> application essay writing service
<a href=https://payforanessaysonline.com/>pay to write essay</a> buy essays online <a href=https://buycheapessaysonline.com/>order essay online</a> pay for essays
resume writing services online https://domyhomeworkformecheap.com
Thanks! Ample posts!
<a href=https://customthesiswritingservice.com/>thesis statment</a> thesis writer <a href=https://writingthesistops.com/>thesis statement</a> good thesis statement
Kudos. I like it!
<a href="https://bestpaperwritingservice.com/">pay for research paper</a> custom papers <a href="https://bestonlinepaperwritingservices.com/">paper writing service reviews</a> buying papers for college
<a href=https://domyhomeworkformecheap.com/>can you do my homework</a> can you do my homework <a href=https://domycollegehomeworkforme.com/>homework help cpm</a> should i do my homework
self reflective essay on writing https://buycheapessaysonline.com
Thanks a lot! Ample posts!
<a href="https://theessayswriters.com/">write me an essay</a> make an essay <a href="https://bestcheapessaywriters.com/">essay writer no plagiarism</a> essay writer free trial
This is nicely expressed. !
<a href=https://essayssolution.com/>ai essay writer</a> do my essay <a href=https://cheapessaywriteronlineservices.com/>writing a good essay</a> write my essay
Very good stuff, Cheers.
<a href=https://payforanessaysonline.com/>buy an essay</a> buy essays <a href=https://buycheapessaysonline.com/>pay for an essay</a> pay for essay
Nicely put, Kudos!
<a href="https://bestpaperwritingservice.com/">pay for research paper</a> pay someone to write your paper <a href="https://bestonlinepaperwritingservices.com/">order custom paper</a> paper writing service reviews
Awesome knowledge. Kudos!
<a href=https://studentessaywriting.com/>buy essay online writing service</a> writing services <a href=https://essaywritingserviceahrefs.com/>essay writing paper</a> best essay writing website
Many thanks. Valuable information!
<a href="https://customthesiswritingservice.com/">define thesis</a> how to write thesis <a href="https://writingthesistops.com/">thesis writing</a> thesis writing service
With thanks, Loads of facts.
<a href=https://essaywritingservicelinked.com/>college essay writing service</a> best resume writing service <a href=https://essaywritingservicetop.com/>essay writing prompts</a> custom dissertation writing service
<a href="https://topswritingservices.com/">paper writing services for college students</a> essay writing courses online free <a href="https://essaywriting4you.com/">best essay writing service</a> article writing service
<a href=https://theessayswriters.com/>automatic essay writer</a> write paper for me <a href=https://bestcheapessaywriters.com/>do my essay</a> help me write my essay
With thanks, A lot of information!
<a href="https://essaypromaster.com/">write paper for me</a> writing a research paper <a href="https://paperwritingservicecheap.com/">write paper</a> essay writers
Terrific content. With thanks.
<a href=https://quality-essays.com/>pay someone to write my college essay</a> pay for essays <a href=https://buyanessayscheaponline.com/>pay for essay reviews</a> buy essays cheap
<a href="https://hireawriterforanessay.com/">write my essay cheap</a> write my research paper for me <a href="https://theessayswriters.com/">who can write my essay</a> writing an opinion essay
Cheers. Lots of information.
<a href=https://researchproposalforphd.com/>write my term paper</a> research paper writer <a href=https://writingresearchtermpaperservice.com/>cheap research paper writing service</a> research proposal cover page
Helpful posts. Kudos.
<a href="https://phdthesisdissertation.com/">dissertation writing</a> dissertation writing services <a href="https://writeadissertation.com/">dissertation help services</a> phd thesis
With thanks, Loads of postings.
<a href=https://studentessaywriting.com/>essay writing help service</a> writing essay <a href=https://essaywritingserviceahrefs.com/>term paper writing service</a> best college paper writing service
Wonderful data, With thanks.
<a href="https://studentessaywriting.com/">online essay writing</a> college essay writing help <a href="https://essaywritingserviceahrefs.com/">custom essay writing service org reviews</a> online essay writing service
Well voiced genuinely! !
<a href=https://essaypromaster.com/>how to write an analysis paper</a> write my paper <a href=https://paperwritingservicecheap.com/>pay for paper</a> write a paper
Cheers! An abundance of knowledge.
<a href="https://payforanessaysonline.com/">buy essays online</a> pay someone to write paper <a href="https://buycheapessaysonline.com/">pay to write essay</a> pay for essay
<a href=https://helpwithdissertationwriting.com/>dissertation editing</a> dissertation help <a href=https://dissertationwritingtops.com/>dissertation data analysis help</a> phd thesis
us essay writing services https://writeadissertation.com
Thanks a lot! Ample tips!
<a href="https://payforanessaysonline.com/">pay to write essay</a> pay someone to write paper <a href="https://buycheapessaysonline.com/">buy an essay</a> buy essays online
Seriously quite a lot of superb knowledge.
<a href=https://helpwithdissertationwriting.com/>dissertation help services</a> dissertation abstracts <a href=https://dissertationwritingtops.com/>phd dissertation</a> what is a phd
Regards, A lot of knowledge.
<a href="https://writinganessaycollegeservice.com/">essay writing tips</a> essay writing service review <a href="https://essayservicehelp.com/">personal essay writing service</a> smart writing service
<a href=https://helpwithdissertationwriting.com/>phd dissertation writing</a> dissertations <a href=https://dissertationwritingtops.com/>dissertation paper</a> best dissertation
custom writings https://writingresearchtermpaperservice.com
You've made your point pretty nicely!.
<a href="https://englishessayhelp.com/">medical school personal statement</a> writing helper <a href="https://essaywritinghelperonline.com/">essay bot</a> college application essay help
Great information, Cheers!
<a href=https://essaypromaster.com/>paper writers for college</a> paper writer services <a href=https://paperwritingservicecheap.com/>pay someone to write a paper</a> pay someone to write your paper
Beneficial tips. Thank you!
<a href="https://ouressays.com/">term paper help</a> proposal writing <a href="https://researchpaperwriterservices.com/">proposal essay</a> research paper helper
You said it adequately.!
<a href="https://topswritingservices.com/">term paper writing services</a> college essays writing <a href="https://essaywriting4you.com/">essay writer help</a> best rated essay writing service
<a href=https://englishessayhelp.com/>essay helper</a> how to write a college essay <a href=https://essaywritinghelperonline.com/>essay help</a> the college essay guy
how to write a good conclusion for an essay https://writingthesistops.com
Very good material. Thank you.
<a href=https://studentessaywriting.com/>custom dissertation writing service</a> writing essay services <a href=https://essaywritingserviceahrefs.com/>service to others essay</a> best essay writing service australia
Tips effectively considered..
<a href="https://phdthesisdissertation.com/">dissertation abstracts international</a> dissertation data analysis help <a href="https://writeadissertation.com/">dissertation writing services reviews</a> doctoral dissertation
<a href=https://topswritingservices.com/>best assignment writing service</a> i need help writing an essay <a href=https://essaywriting4you.com/>custom paper writing service</a> college paper writing service
good college essay introductions https://writingresearchtermpaperservice.com
Really tons of wonderful info.
<a href="https://customthesiswritingservice.com/">tentative thesis</a> thesis statements <a href="https://writingthesistops.com/">good thesis statement</a> thesis writing
<a href="https://essayssolution.com/">write paper for me</a> write an essay for me <a href="https://cheapessaywriteronlineservices.com/">writing a good essay</a> write my essay
<a href=https://domyhomeworkformecheap.com/>my homework</a> do my math homework <a href=https://domycollegehomeworkforme.com/>do my programming homework</a> can you do my homework
writer service https://service-essay.com
<a href="https://theessayswriters.com/">write paper for me</a> essay writer review <a href="https://bestcheapessaywriters.com/">essay writer free trial</a> online essay writers
<a href="https://helpwithdissertationwriting.com/">dissertation abstracts international</a> dissertations <a href="https://dissertationwritingtops.com/">dissertation editing services</a> phd thesis
<a href=https://phdthesisdissertation.com/>dissertations</a> dissertation meaning <a href=https://writeadissertation.com/>proquest dissertations</a> dissertation abstracts
words to use in a college essay https://argumentativethesis.com
Very good stuff. Regards.
<a href=https://homeworkcourseworkhelps.com/>homework help</a> do my college homework <a href=https://helpmedomyxyzhomework.com/>can you do my homework</a> online coursework
Incredible a lot of useful info!
<a href="https://phdthesisdissertation.com/">definition of dissertation</a> dissertation definition <a href="https://writeadissertation.com/">dissertation def</a> dissertation writing services
Useful advice. Thanks a lot!
<a href="https://ouressays.com/">research proposals</a> buy a research paper <a href="https://researchpaperwriterservices.com/">term paper</a> thesis proposal
<a href=https://topswritingservices.com/>easy essay writing</a> which essay writing service is the best <a href=https://essaywriting4you.com/>research paper writing service</a> essay on service
essay prompts college https://helpwritingdissertation.com
Thanks! I appreciate this!
<a href=https://essayssolution.com/>essay writter</a> what should i write my college essay about <a href=https://cheapessaywriteronlineservices.com/>write a essay</a> online essay writer
You said it adequately..
<a href="https://essaypromaster.com/">pay someone to write a paper</a> write my paper <a href="https://paperwritingservicecheap.com/">professional essay writers</a> kindergarten writing paper
Wow lots of terrific advice.
<a href="https://essaywritingservicelinked.com/">writing essay services</a> essay writing meme <a href="https://essaywritingservicetop.com/">essay writing</a> best rated essay writing service
<a href=https://helpwithdissertationwriting.com/>phd paper</a> dissertation abstract <a href=https://dissertationwritingtops.com/>dissertation service</a> writing dissertation
personal statement writing service https://bestpaperwritingservice.com
Nicely put. Thanks a lot!
<a href=https://argumentativethesis.com/>thesis topic</a> doctoral thesis <a href=https://bestmasterthesiswritingservice.com/>good thesis statement</a> thesis proposal example
You definitely made the point.
<a href="https://essaypromaster.com/">pay someone to write your paper</a> how to write a philosophy paper <a href="https://paperwritingservicecheap.com/">how to write an abstract for a research paper</a> professional essay writers
Thanks a lot, Wonderful stuff.
<a href=https://englishessayhelp.com/>cheap essay help</a> need help writing an essay <a href=https://essaywritinghelperonline.com/>need help writing an essay</a> essay writer
Whoa lots of amazing information.
<a href="https://domyhomeworkformecheap.com/">xyz homework</a> coursework <a href="https://domycollegehomeworkforme.com/">do my finance homework</a> do my college homework
<a href=https://englishessayhelp.com/>helping others essay</a> argumentative essay <a href=https://essaywritinghelperonline.com/>free writing assistant</a> help with my essay
english literature essay help https://bestmasterthesiswritingservice.com
You've made the point.
<a href=https://homeworkcourseworkhelps.com/>do my college homework</a> reddit do my homework <a href=https://helpmedomyxyzhomework.com/>pay someone to do my homework</a> do my programming homework
Position very well used!.
<a href="https://essaywritingservicelinked.com/">best essay writing service reviews</a> cheap custom writing service <a href="https://essaywritingservicetop.com/">essay writing samples</a> my essay service
Lovely content, Thanks!
<a href="https://quality-essays.com/">pay for an essay</a> pay for essay reviews <a href="https://buyanessayscheaponline.com/">pay for an essay</a> buy essay papers
<a href=https://helpwithdissertationwriting.com/>writing dissertation</a> dissertations online <a href=https://dissertationwritingtops.com/>dissertation proposal</a> dissertation assistance
auto essay writer https://researchpaperwriterservices.com
Thanks a lot! I enjoy it!
<a href=https://homeworkcourseworkhelps.com/>cpm homework</a> do my homework <a href=https://helpmedomyxyzhomework.com/>do my chemistry homework</a> online coursework
Lovely write ups, With thanks.
<a href="https://dissertationwritingtops.com/">dissertation service</a> dissertation writing service <a href="https://helpwritingdissertation.com/">dissertations</a> dissertations online
<a href=https://essaytyperhelp.com/>essay writing service</a> help essay <a href=https://helptowriteanessay.com/>argumentative essay</a> essay writing service
literature review writing service https://domyhomeworkformecheap.com
best essay writing service 2017 <a href="https://essayservicehelp.com/">free will writing service edinburgh</a> mba resume writing service
You have made your point.
<a href="https://essaywritingservicehelp.com/">linkedin writing service</a> cv writing service <a href="https://essaywritingservicebbc.com/">best college paper writing service</a> linkedin writing service
Nicely put, Regards!
<a href="https://topswritingservices.com/">top rated essay writing service</a> essay writing help <a href="https://essaywriting4you.com/">best resume writing service 2020</a> last minute essay writing service
<a href=https://domyhomeworkformecheap.com/>homework</a> do my math homework for me <a href=https://domycollegehomeworkforme.com/>pay to do my homework</a> homework help
best online resume writing services https://essaywriting4you.com
Fantastic forum posts, Cheers.
<a href="https://theessayswriters.com/">write my essays online</a> writing a persuasive essay <a href="https://bestcheapessaywriters.com/">writing a persuasive essay</a> write paper for me
Nicely put. Kudos!
<a href=https://researchproposalforphd.com/>research proposal cover page</a> research proposal apa <a href=https://writingresearchtermpaperservice.com/>term paper</a> term papers
Amazing quite a lot of superb facts!
<a href="https://service-essay.com/">pay someone to write paper</a> professional paper writing service <a href="https://custompaperwritingservices.com/">online paper writing service</a> best college paper writing service
<a href=https://domyhomeworkformecheap.com/>do my college homework</a> do my programming homework <a href=https://domycollegehomeworkforme.com/>i don t want to do my homework</a> pay someone to do my homework
community college essay https://essaywritingservicetop.com
Regards, Awesome stuff.
<a href=https://writinganessaycollegeservice.com/>service to others essay</a> essay writing service cheap <a href=https://essayservicehelp.com/>cover letter writing service</a> best online resume writing service
<a href="https://writingpaperforme.com/">pay someone to write your paper</a> writing a research paper <a href="https://custompaperwritersservices.com/">write my paper for me</a> write my research paper
<a href=https://writingpaperforme.com/>how to write an analysis paper</a> college papers for sale <a href=https://custompaperwritersservices.com/>professional essay writers</a> paper writers for college
dissertation ideas https://hireawriterforanessay.com
Great data, Regards.
essay writing website <a href=https://essayservicehelp.com/>buy essay writing service</a> personal statement writing service
With thanks, Useful information.
<a href="https://domyhomeworkformecheap.com/">do my programming homework</a> do my homework <a href="https://domycollegehomeworkforme.com/">do my math homework</a> homework
Truly quite a lot of wonderful material!
<a href="https://bestpaperwritingservice.com/">research paper writing service</a> college paper writing service <a href="https://bestonlinepaperwritingservices.com/">pay for papers</a> professional paper writing service
<a href=https://phdthesisdissertation.com/>dissertation definition</a> dissertation assistance <a href=https://writeadissertation.com/>dissertation assistance</a> doctoral dissertation
essay writing service scams https://essaypromaster.com
Kudos, Loads of information.
<a href=https://ouressays.com/>buy a research paper</a> research proposals <a href=https://researchpaperwriterservices.com/>research paper writers</a> research paper help
Regards! An abundance of facts!
<a href=https://service-essay.com/>custom papers</a> paper writing services <a href=https://custompaperwritingservices.com/>online paper writing service</a> pay someone to write a paper
Thank you. A lot of advice!
<a href="https://writinganessaycollegeservice.com/">spanish essay writing service</a> cheap paper writing service <a href="https://essayservicehelp.com/">essay help service</a> custom essay writing service
Beneficial facts. Regards!
<a href=https://writingpaperforme.com/>research paper writer services</a> paper writer <a href=https://custompaperwritersservices.com/>paper writing service</a> lined writing paper
Beneficial tips. Appreciate it.
<a href="https://essaypromaster.com/">writing papers</a> paper writer online <a href="https://paperwritingservicecheap.com/">write paper</a> how to write an analysis paper
Very good material. Thanks a lot!
<a href=https://homeworkcourseworkhelps.com/>do my homework for me</a> cpm homework <a href=https://helpmedomyxyzhomework.com/>do my college homework</a> homework help
<a href="https://writingpaperforme.com/">writing a research paper</a> research paper writer <a href="https://custompaperwritersservices.com/">how to write a conclusion for a research paper</a> paper writing service
<a href=https://researchproposalforphd.com/>research paper writer</a> research paper helper <a href=https://writingresearchtermpaperservice.com/>research paper help</a> research paper writing service
how to write a college entrance essay https://buycheapessaysonline.com
This is nicely put. !
<a href="https://hireawriterforanessay.com/">make an essay</a> write a essay for me <a href="https://theessayswriters.com/">write my resume for me</a> who can write my essay
Kudos! Very good information!
<a href="https://researchproposalforphd.com/">elements of a research proposal</a> research proposal <a href="https://writingresearchtermpaperservice.com/">research paper writer services</a> term paper help
<a href=https://ouressays.com/>research proposals</a> write my research paper for me <a href=https://researchpaperwriterservices.com/>buy term paper</a> research paper writer
college reflective essay https://essaywritingservicetop.com
Thank you, I like it!
<a href="https://homeworkcourseworkhelps.com/">xyz homework</a> do my chemistry homework <a href="https://helpmedomyxyzhomework.com/">do my math homework</a> do my chemistry homework
Helpful forum posts. Many thanks!
<a href="https://hireawriterforanessay.com/">what should i write my college essay about</a> essay writers <a href="https://theessayswriters.com/">essay write</a> write my research paper for me
<a href=https://researchproposalforphd.com/>termpaper</a> buy a research paper <a href=https://writingresearchtermpaperservice.com/>parts of a research proposal</a> research paper helper
dissertations https://service-essay.com
Thanks a lot. I enjoy this!
<a href="https://researchproposalforphd.com/">proposal writing</a> writing proposal <a href="https://writingresearchtermpaperservice.com/">research paper writing service</a> buy term papers online
<a href="https://researchproposalforphd.com/">buy term papers online</a> online proposal <a href="https://writingresearchtermpaperservice.com/">cheap research paper writing service</a> research paper writer
Fantastic material. Cheers!
<a href="https://researchproposalforphd.com/">research proposal</a> research paper proposal <a href="https://writingresearchtermpaperservice.com/">buy research paper</a> research proposal cover page
<a href=https://helpwithdissertationwriting.com/>dissertation paper</a> dissertation proposal <a href=https://dissertationwritingtops.com/>proquest dissertations</a> dissertation help services
press release writing service https://customthesiswritingservice.com
This is nicely said! !
<a href=https://payforanessaysonline.com/>pay someone to write my college essay</a> pay for college papers <a href=https://buycheapessaysonline.com/>where to buy essays online</a> pay for essay
Nicely put. With thanks.
<a href="https://payforanessaysonline.com/">buy essays online</a> pay to write paper <a href="https://buycheapessaysonline.com/">buy essays cheap</a> essays for sale
<a href="https://payforanessaysonline.com/">buy essay papers</a> pay to write my essay <a href="https://buycheapessaysonline.com/">pay to write paper</a> pay for papers
<a href=https://theessayswriters.com/>write an essay for me</a> writing an opinion essay <a href=https://bestcheapessaywriters.com/>write my essay for me</a> write essay
how to write a comparing and contrasting essay https://bestonlinepaperwritingservices.com
Cheers, An abundance of facts!
<a href=https://writingpaperforme.com/>paper writer online</a> how to write a reflection paper <a href=https://custompaperwritersservices.com/>professional essay writers</a> how to write a reflective paper
Terrific tips. Kudos!
<a href="https://dissertationwritingtops.com/">writing help</a> phd dissertation writing <a href="https://helpwritingdissertation.com/">buy dissertations</a> dissertation paper
<a href="https://homeworkcourseworkhelps.com/">coursework</a> do my math homework <a href="https://helpmedomyxyzhomework.com/">homework help</a> online coursework
<a href=https://argumentativethesis.com/>doctoral thesis</a> argumentative thesis statement <a href=https://bestmasterthesiswritingservice.com/>thesis template</a> good thesis statement
write my essay south park https://domyhomeworkformecheap.com
Thanks a lot. Numerous write ups!
<a href=https://essaywritingservicelinked.com/>admission essay writing service</a> the best essay writing service <a href=https://essaywritingservicetop.com/>essay writing service 3 hours</a> online essay writing services
Really plenty of useful data.
<a href="https://writingpaperforme.com/">write my research paper</a> how to write a philosophy paper <a href="https://custompaperwritersservices.com/">write a research paper</a> do my paper
Regards, I enjoy this.
<a href="https://essaypromaster.com/">college papers for sale</a> essay writers <a href="https://paperwritingservicecheap.com/">pay someone to write my paper</a> write a paper for me
<a href=https://writingpaperforme.com/>paper writing services</a> how to write a conclusion for a research paper <a href=https://custompaperwritersservices.com/>how to write a philosophy paper</a> essay writter
best college essay help https://phdthesisdissertation.com
Excellent data. Kudos!
<a href=https://helpwithdissertationwriting.com/>dissertations</a> dissertations <a href=https://dissertationwritingtops.com/>phd dissertation</a> dissertation help
Helpful knowledge. Thanks a lot!
<a href="https://argumentativethesis.com/">thesis statement</a> writing a thesis <a href="https://bestmasterthesiswritingservice.com/">thesis topic</a> thesis proposal example
You said it adequately..
<a href=https://englishessayhelp.com/>assignment help</a> help writing essay <a href=https://essaywritinghelperonline.com/>assignment help</a> help me write an essay
Fine advice. Many thanks.
<a href="https://essaytyperhelp.com/">help writing essay</a> cheap essay help <a href="https://helptowriteanessay.com/">help writing essay</a> college application essay help
You have made your stand extremely effectively.!
<a href="https://ouressays.com/">research proposal apa</a> elements of a research proposal <a href="https://researchpaperwriterservices.com/">research proposal cover page</a> research paper helper
<a href=https://domyhomeworkformecheap.com/>should i do my homework</a> reddit do my homework <a href=https://domycollegehomeworkforme.com/>do my chemistry homework</a> do my math homework for me
article rewriting service https://writingpaperforme.com
<a href=https://bestpaperwritingservice.com/>paper writer services</a> custom research paper writing services <a href=https://bestonlinepaperwritingservices.com/>graduate paper writing service</a> pay someone to write paper
Really many of fantastic information.
<a href="https://homeworkcourseworkhelps.com/">do my homework for me</a> do my finance homework <a href="https://helpmedomyxyzhomework.com/">can you do my homework</a> homework help cpm
This is nicely put. .
<a href=https://researchproposalforphd.com/>termpaper</a> term paper <a href=https://writingresearchtermpaperservice.com/>research paper writer services</a> research proposal cover page
Many thanks! Quite a lot of forum posts.
<a href="https://studentessaywriting.com/">best resume writing service 2019</a> cheap research paper writing service <a href="https://essaywritingserviceahrefs.com/">essay writing app</a> online check writing service
<a href=https://essaytyperhelp.com/>essays help</a> help me write an essay <a href=https://helptowriteanessay.com/>help me write an essay</a> best essay writing service
uc college essay prompts https://quality-essays.com
Superb content. Thanks!
<a href="https://argumentativethesis.com/">thesis writing service</a> define thesis statement <a href="https://bestmasterthesiswritingservice.com/">argumentative thesis statement</a> thesis sentence
Point well used.!
<a href="https://domyhomeworkformecheap.com/">homework help cpm</a> pay someone to do my homework <a href="https://domycollegehomeworkforme.com/">do my homework for money</a> cpm homework help
Regards! Numerous postings.
<a href=https://hireawriterforanessay.com/>write my thesis for me</a> writing a good essay <a href=https://theessayswriters.com/>write my essay for me free</a> write my essay
Kudos, Great information.
<a href="https://bestpaperwritingservice.com/">buying papers for college</a> pay to write paper <a href="https://bestonlinepaperwritingservices.com/">buy college paper</a> buy a paper for college
Thanks a lot, Plenty of write ups.
<a href=https://hireawriterforanessay.com/>essay writers online</a> online essay writer <a href=https://theessayswriters.com/>essay writer no plagiarism</a> write my research paper for me
Beneficial stuff. With thanks.
<a href="https://bestpaperwritingservice.com/">pay for college papers</a> pay for research paper <a href="https://bestonlinepaperwritingservices.com/">buy a paper</a> best college paper writing service
<a href=https://essaypromaster.com/>my paper writer</a> pay someone to write a paper <a href=https://paperwritingservicecheap.com/>paper writer online</a> write my paper for me
professional essay help https://essaywritingserviceahrefs.com
Many thanks! An abundance of advice.
<a href="https://phdthesisdissertation.com/">what is a phd</a> dissertation uk <a href="https://writeadissertation.com/">definition of dissertation</a> dissertation writing services reviews
Cheers. Fantastic information.
<a href=https://essayssolution.com/>essay writer website</a> write my research paper for me <a href=https://cheapessaywriteronlineservices.com/>essay writers</a> write an essay for me
Superb write ups. Regards.
<a href="https://phdthesisdissertation.com/">dissertation writing service</a> dissertations online <a href="https://writeadissertation.com/">best dissertation</a> dissertation uk
<a href=https://helpwithdissertationwriting.com/>dissertation definition</a> dissertation writing service <a href=https://dissertationwritingtops.com/>writing a dissertation</a> dissertation definition
custom writing website https://cheapessaywriteronlineservices.com
Awesome information. Kudos.
<a href="https://essaypromaster.com/">how to write an analysis paper</a> writers of the federalist papers <a href="https://paperwritingservicecheap.com/">essay writers online</a> how to write a reflection paper