Мастер-микс для ПЦР с высокоточной ДНК-полимеразой с «горячим» стартом Phusion U Hot Start

ДНК-полимераза Phusion U Hot Start – новая термостабильная ДНК-полимераза, полученная генно-инженерным путём. Благодаря внесению модификации в дНТФ-связывающий карман полимеразы Phusion было снято ограничение, характерное для высокоточных полимераз – неспособность встраивать дезоксиурацилтрифосфат. Phusion U способна как встраивать урациловый остаток, так и считывать его в ДНК-матрице.

Помимо этого, Phusion U обладает всеми характеристиками ДНК-полимераз Phusion – точностью, скоростью, способностью синтезировать длинные последовательности (до 20 тыс. п.н.). Частота ошибок у полимеразы Phusion U в 25 раз ниже, чем у стандартной Taq ДНК-полимеразы. Встроенная функция горячего старта реализуется благодаря комбинации фермента со специфическим лигандом Affibody, ингибирующим полимеразную и 3’→5’ экзонуклеазную активности при комнатной температуре.

Эти особенности делают ДНК-полимеразу Phusion U оптимальным ферментом для амплификации повреждённой ДНК, ДНК после бисульфитной конверсии, а также для постановки ПЦР со сниженным риском контаминации.

Мастер-микс для ПЦР Phusion U Hot Start – это 2-кратная готовая реакционная смесь для ПЦР, содержащая ДНК-полимеразу Phusion U Hot Start, дезоксинуклеотидтрифосфаты (400 мкМ каждого) и оптимизированный буфер с MgCl₂ (1,5 мМ в конечной концентрации). Таким образом, пользователю остаётся только добавить матрицу и праймеры. Мастер-микс – это удобный формат для постановки ПЦР, позволяющий экономить время и снизить число пипетирований, уменьшая тем самым риск ошибки.

Кроме пробирок с мастер-миксом Phusion U Hot Start, в набор входят отдельные пробирки с водой, не содержащей нуклеаз.

ДНК-полимераза Phusion U Hot Start синтезирует ПЦР-продукты с тупыми концами.

Условия хранения - 20 °С.

Особенности мастер-миксов Phusion U Hot Start:

• высокая точность синтеза (в 25 раз выше по сравнению с Taq);
• способность встраивать в ДНК дУТФ и использовать урацил-содержащие последовательности ДНК в качестве матрицы;
• отсутствие неспецифического синтеза и деградации праймеров в процессе подготовки ПЦР;
• высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд.

Области применения:

• амплификация ДНК после бисульфитной конверсии;
• амплификация повреждённой или деградированной ДНК;
• ПЦР с минимальным риском контаминации посторонними ПЦР-продуктами;
• методы клонирования на основе вырезания урациловых остатков ( USER).